| 体外活性 | 该酶对ONPG的水解能力极高(100%),对其天然底物乳糖的活性中等(25.7%)。然而,该酶对所有其他的含硝基苯基类似物的水解能力非常弱,表明Gal308是一种底物特异性狭窄的β-半乳糖苷酶。为了研究重组酶的动力学参数,测定了Gal308对ONPG和乳糖的迈克利斯-莫滕常数(Km)、转化数(kcat)和催化效率(kcat/Km)。对于ONPG,kcat和Km值分别为464.7±7.8 s^-1和2.7±0.3 mM;对于乳糖,相应值为264.2±2.1 s^-1和7.1±0.8 mM。酶对ONPG的kcat/Km值(172.1 s^-1mM^-1)是对乳糖的4.6倍(37.2 s^-1mM^-1),明显展示了Gal308对ONPG的催化效率远高于对乳糖。 |